Шелкопряд спина коллагена в коконах
БИОТЕХНОЛОГИЯ
Коллаген, сильные и биосовместимых белок широко используется в производстве лекарств и тканевой инженерии, в настоящее время, полученных из кожи коровы, что сопряжено с высоким риском заражения и может вызвать аллергические реакции. Теперь группа исследователей из префектуры Хиросимы института промышленной науки и технологии (HPIIST; <a target="_blank" href="http://www.sankaken.gr.jp" rel="nofollow"> www.sankaken . gr.jp </ A>) и Хиросимы Univ. (HU; <a target="_blank" href="http://www.hiroshima-u.ac.jp" rel="nofollow"> www.hiroshima-u.ac.jp </ A>) разработали альтернативный источник рекомбинантного человеческого коллагена (RHC), которая является безопасной и масштабируемой трансгенных шелковичных червей. "ВотЬух топ является хорошим кандидатом для промышленного серийного производства RHC потому что она может синтезировать огромное количество протеины шелка в шелковых желез", говорит Масахиро Томита, главный научный сотрудник HPIIST.
Ученые построили последовательность ДНК, которая подготовила слияния белка, содержащего обычных белков шелка, флуоресцентных маркеров, а также краткая форма молекулы прекурсора для человека коллагена типа III. Эта ДНК была включена в вектор (или перевозчика молекулы) и вводили яиц тутового шелкопряда. Как только пожилые, насекомые производят белка в своих желез шелка и выделяют его в коконах. Pupas являются вырезанные из коконов. Коконов относятся с 1 мг / мл трипсина удалить sericins (т.е. физическое или белков без слияния шелк) и растворяют в 6 молярной (M) гуанидинтиоцианатных раствора, содержащего 5% об. Ъ-меркаптоэтанол (б- ME). Растворимых белков (в том числе коллаген) осаждают сульфат аммония, восстановить центрифугированием, растворяли в гуанидинтиоцианатных / BME и очищали гель-фильтрации в одном хроматографического шаг. "Доходность слияния белка 3,7 пг / мг белка объема добычи, или 0,84 пг / мг сухого кокона", отмечает Томита.
HU исследователь Katsutoshi Yoshizato оценкам, 1,5 миллиона генетически модифицированных шелковичных червей (600 кг в год в коконах) может принести до 5 кг в год коллагена. "В базовую стоимость 5-10 (центов) для получения 1 кокона тутового шелкопряда в комнате разведения, будет стоить $ 12500 - $ 25000, чтобы производить достаточное количество коконов выход 1 кг коллагена," говорит он.
В настоящее время ученые ведут предварительные переговоры с несколькими японскими фармацевтических компаний о коммерциализации технологии биоинженерии, коллаген, для таких приложений, как искусственные кожи и повязки. Yoshizato быть осторожным, чтобы отметить, что некоторые человеческие белки могут быть обработаны правильно насекомых клеток. "Однако, это не может быть большой проблемой, так как коллаген плохо фосфорилированных и гликированного", говорит он.
